普通pcr引物设计和荧光定量pcr引物设计的区别
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实时定量的引物设计要求比较高，可以按普通引物设计的方法来做，但是设计时要注意扩增的片段不能太大，最好在250bp-100bp之间。同时要保证这对引物有绝对的特异性，因为要是产生非特异性扩增的话，就不能准确的计量模板量了，这样就失去了实时定...
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建议你还是选择CDS区不一样的地方设计引物吧，这样可以避免交叉污染引起的非特异扩增，扩增的序列长度不一定要一样，每个引物你最好设计两三对，然后做一个相对定量看看不同引物的扩增效率，选择比较好的两对引物做后续试验，内参基因的引物不需...
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NF-KBmRNA不就是NF-KB的mRNA么 做定量PCR就是测它mRNA的表达量啊 NF-KBP65是NF-KB3 NF-KBP52是NF-KB2 所以这两个还是有区别的 如果你是要检测65的话
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