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回答者:网友
使用牛肉膏蛋白胨培养基
组成成分:牛肉膏 3g,蛋白胨 10g,Nacl 5g,琼脂 15~20g,水1000mL,PH7.4~7.6。
具体配置步骤:
1.称来自药品 按实际用量计算后,按配方称取各种药品放入360问答大烧杯中.牛肉膏可放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶解后倒入大烧杯;也可放在称量纸上称量,随后放入热水中,牛肉膏使与称量纸分离,立即取出纸片盟货分势历银历话斤冲.蛋白胨极易吸潮,供演团蒸神屋苗故称量时要迅速.
2.加热溶解 本千钢走占饭亮罪树古在烧杯中加入少于所需要的水量,然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒搅拌,待药品完全溶解后再补充水分至所需量.若奏布滑配制固体培养基,则将称好的琼脂放入己溶解的药品中,再加热融化,此过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,最后补足所失的水分.
3. 调p单器逐春弦法全响费H 检测培养基的pH,若弦她风pH偏酸,可滴加lmol/L NaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸检测,直至达到所需pH范围.若偏碱,则用lmol/L HCl进行调节.pH的调节通常放在加琼脂之前.雨毫水全思守乱织应注意pH值不要调过头,以鲜候免回调而影响培养基内各离子的浓度.
4.过滤 液体培养基可用滤纸过滤,固体培养基可用4层纱布趁热过滤,以利培养的观察.但是供一般使用的培养基史剧析混晚序互,这步可省略.
5.分装 按实验要求,可将配制的培养基分装入试管或三角瓶内.分装时可用漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上而造成污染.
分右赵溶讨宗输慢括极装量:固体培养基约为试管高度的l/5,灭菌后制成斜面.分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜.半固体培养基以试管高度的1/3为迫收在检欢夫科数宜,灭菌后垂直待凝.
6.加棉塞 试管口和三角瓶口塞上用待吸策席极架者响州积伟普通棉花(非脱脂棉)制作的棉塞.棉塞的形状,大小和松紧度要合适,四周紧贴管壁,不留缝隙卫复革械织,才能起到防止杂菌侵入和有利通气的作用.要使棉塞总长约3/5塞入试管口或瓶口内,以防棉塞脱落.有些微生物需要更好的通气,则可用8层纱布制成通气塞.有时也可用试管帽或塑料塞代替棉塞.
7.包扎 加塞后,将三角瓶的棉塞外包一层牛皮纸或双层报纸,以防灭菌时冷凝水沾湿棉景音准息短塞.若培养基分装于试管中,则应以5支或7支在一起,再于棉塞外包一层牛皮纸,用绳扎好.然后用记号笔注明,航余神六款视正培养基名称,组别,日期.
8.灭菌 将上述培养基于121.3℃湿热灭菌20min.如因特殊情况不能及时灭菌,则应故人冰箱内暂存.
9.无菌检查 将灭菌的培养基放入希土何以拿音破除量鸡37℃温箱中培养24~48h,无菌生长即可使用,或贮存于冰箱或清洁的橱内,备用.
大肠杆菌的培养:
37摄氏度,恒温作志门许不史培养48到72小时,因为接种区织蛋原照和抓红角时和具体培养条件的不同,其生长一般都在2天外才能长出明显的菌落。
菌落特征:乳白色,圆形,菌落边缘整齐,表面光滑,表面和背面颜色一致。