如何做rna seq 的peak图

样品提取总RNA后，对于真核生物，用带有Oligo(dT)的磁珠富集mRNA，对于原核生物表试温明简抗压，用试剂盒去除rRNA，向来自得到的mRNA中加入Fragmentation Buffer使其片断成为短片段，再以片断后的mRNA为模板，用六碱基随机引360问答物(random hexamers)合成cDNA第一链，并加入缓冲液、dNTPs、RNase H 和DNA polymerase I 合成cDNA第二链，经过QiaQui子ck PCR试剂盒纯化并加 EB缓冲液洗脱经末端修复、加碱基A，加测序接头，再经琼脂糖凝胶电泳回收目的大小片段异思需伤践免散，并进行PCR扩增，从而完成整个文库制备工作，构建好的文库用Il样动样各lumina HiSeq2000进行测序。