谁用过总蛋白提取试剂盒（BestBio-贝博生物）50T这个产品啊？

总蛋白提取试剂盒

产品简介：
本试剂盒提供全套试剂，适用于从各种原代或传代细胞和各种实体软组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等哺乳动物组织中提取总蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。本试剂盒含有的独特变性剂能够溶解细胞膜包括细胞质膜和核膜。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等蛋白研究。

产品组成：
产品组成 310003 310004
规格 50 assays 100 assays
Buffer I 25ml 50ml
蛋白酶抑制剂混合物 100ul 200ul

使用方法：
A． 细胞总蛋白提取
1. 裂解液制备：每500ul冷的Buffer I中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2. 取5-10×106个细胞，在4℃，1000rpm条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞
3. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4. 每5×106个细胞中加入500ul冷的裂解液，混匀后，在4℃条件下振荡15-20分钟。
5. 在4℃，14000rpm条件下离心15分钟。
6. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到总蛋白。

B． 组织总蛋白提取
1. 裂解液制备：每500ul冷的Buffer I中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2. 取100mg组织样本剪碎，加入，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
3. 将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中，在4℃，10000rpm条件下离心5分钟。
4. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到总蛋白。
上述蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用。

注意事项：
1. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。
2. 整个过程须保持样品处于低温状态。

储存条件：
-20℃保存。

有效期：
一年。

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