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化工问答
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纯培养细菌dna 和环境样品nda 提取有何差异
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回答者:网友
质粒DNA提取一般用沸水浴法和碱裂
解法,现在一般都采用碱裂解
法,并有试剂盒可用。它主要
是将细胞内的环状质粒提取出来,一般需要用S
DS裂解,RNA
酶降解,然后过柱,再进行洗脱.过程比较简单。 而基因组DNA提取则较为复杂,也需要用SDS裂解和RND酶降解,但降解时间较长,
著乐
同时对有些革兰氏阳性细菌还要进行溶菌酶处理,
最后用氯仿-苯酚
进行除蛋白,这一
步重复进行多次,在用氯仿
除去多余的苯酚,用乙醇清洗烘干后溶于TE缓冲液中。整个过程比提质粒更复杂,耗时也更长。
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