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从小鼠新鲜肌肉组织中如何娘同损谓获得胰岛素基因，其基本的实验过程是怎样的
目的采用大肠杆菌β-半乳师记糖酶基因LacZ作为报告基因,建立Tyro3、Axl受体酪氨酸激酶含有loxp位点的转基因小鼠.与不同组织特异性Cre小鼠杂交,获得时空性表达Tyro3、Axl的转基因小鼠,为反代广研究其在各个组织中的功能奠定基础.方法构建含有loxp位点的Tyro3、Axl受体酪氨酸孩吧态通剂弦止封跳国激酶质粒,测序正确后,通过显微注射法将插入CAG启动子下游的Geo-STOP-msAxl及Ge八后相玉宽天宗o-STOP-msTyro3基因的转基因载体注射就军车核入BDF1供体鼠受精卵府罪说,移植受精卵至ICR受体鼠,待产仔后,通过双引物PCR鉴定F0以及Fn代小鼠的基因型,RT-PCR,X-gal染色观察小鼠组织中LacZ基因,运用WB(We是复出将受宪质多曾案子stern Blot)检测转基因小鼠和野生型小鼠体内目的蛋白表达的差异.结果获得了含有目的基因的转基因阳性小鼠;通过RT-PCR对阳性小鼠证明LacZ基因的存在;对存在L给减销对acZ基因的小鼠进行X-gal染色,在Geo仍-STOP-msTyro3的脑、睾丸、胸腺中观察到蓝色沉淀,在Geo-STOP-msAxl的脑、心、肾中观察到蓝色沉淀,间接说明目的基因能表达的组织和器官;对双阳性的Geo-STOP-msTyro3、Geo-STOP-msAx率查l转基因小鼠和野生型小鼠,WB检验证实Tyro3、Axl基因的表达没有差异,说明在加入stop序列之后,Tyro3基因确实存在,而且表达受到抑制.结论成功建立Geo-STOP-msAxl及Geo-STOP-msTyro3酪氨酸受体转基因小鼠.
