免疫荧光染色的一抗,二抗分别用什么稀释?

做胚胎的免疫荧光染色,抗体是用胚胎培养液稀释,还是用PBS稀释?还是其他?抗体的最佳稀释倍数怎么确定?
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回答者:网友
PBS稀释。当然最好用封闭液直接稀释,再加一点TritonX100效果好。培养液成分太多了。而且固定之后细胞都死了,用培养液没什么意义,只要保证其pH等条件适合就好了。抗体说明书上都会有推荐的稀释倍数。上网查一下,有很多protocol。一般一比几百到一万都有,依抗体而定。可以4度过夜,这样染色效果好。二抗一般较便宜,一般1:50到1:200多。

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