PCR扩增目的基因以后，怎么用琼脂糖电泳回收及纯化呢？希望高手指教！

一般购买纯化试剂盒进行纯化。以Takara公司的试剂盒为例： 1. 使用TAE缓冲液或TBE缓冲液制作琼脂糖凝胶，然后对目的DNA进行琼脂糖凝胶电泳。 2. 在紫外灯下切出含有目的DNA的琼脂糖凝胶，用纸巾吸尽凝胶表面的液体。此时应注意尽量切除不含目的DNA部分的凝胶，尽量减小凝胶体积，提高DNA回收率。 注）切胶时请注意不要将DNA长时间暴露于紫外灯下，以防止DNA损伤。 3. 切碎胶块。胶块切碎后可以加快胶块融化时间，提高DNA的回收率。 4. 称量胶块重量，计算胶块体积。计算胶块体积时，以1 mg=1 μl进行计算。 5. 向胶块中加入胶块融化液DR-I Buffer，DR-I Buffer的加量如下表： 凝胶浓度 DR-I Buffer使用量 1.0％ 3个凝胶体积量 1.0％～1.5％ 4个凝胶体积量 1.5％～2.0％ 5个凝胶体积量 6. 均匀混合后75℃加热融化胶块（低熔点琼脂糖凝胶只需在45℃加热）。此时应间断振荡混合，使胶块充分融化（约6～10分钟）。 注）胶块一定要充分融化，否则将会严重影响DNA的回收率。 7. 向上述胶块融化液中加入DR-I Buffer量的1/2体积量的DR-II Buffer，均匀混合。当分离小于400 bp的DNA片段时，应在此溶液中再加入终浓度为20%的异丙醇。 8. 将试剂盒中的Spin Column安置于Collection Tube上。 9. 将上述操作7的溶液转移至Spin Column中，12,000 rpm离心1分钟，弃滤液。 注）如将滤液再加入Spin Column中离心一次，可以提高DNA的回收率。 10. 将500 μl的Rinse A加入Spin Column中，12,000 rpm离心30秒钟，弃滤液。 11. 将700 μl的Rinse B加入Spin Column中，12,000 rpm离心30秒钟，弃滤液。 注）请确认Rinse B中已经加入了指定体积的100%乙醇。 12. 重复操作步骤11。 13. 将Spin Column安置于Collection Tube上，12,000 rpm离心1分钟。 14. 将Spin Column安置于新的1.5 ml的离心管上，在Spin Column膜的中央处加入25 μl的灭菌蒸馏水或Elution Buffer，室温静置1分钟。 注）把灭菌蒸馏水或Elution Buffer加热至60℃使用时有利于提高洗脱效率。 15. 12,000 rpm离心1分钟洗脱DNA。