传代细胞的培养来自步骤

网友 1

最佳答案

回答者:网友

1、附着型胞(adherentcell)

(1)吸掉旧培养液。

(2)360问答用D-PBS洗涤细胞一至二次。

课乎担境历阶延随销征3)加入tryps民四更in-EDTA溶液(1ml/25cm2,2ml/75cm2),标素写37℃作用数分钟,于倒立显和观是微镜下观察,当细胞将要分离而呈现圆粒状时,吸掉trypsin-EDTA溶液。(若不移去trypsin-EDTA,则在trypsin-EDTA作用后,加入适量含血清之新鲜培养基终止try氢试护今叶福五盐期片维psin作用,离心后再吸掉上清液。

(4)轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱穿独她怕落,加入适量之新鲜培养基,以吸管上下吸放数次以打散细控全亮斗众胞团块,混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶中,以正常培养条部各留送给迫候方由态证件培养。

2、悬浮型细胞(suspensioncell)

(1)吸出细胞培养液,放入离心管中,离心1000rpm5分钟。

(2)吸掉上清液,加入适量之新鲜培养基,混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶中,以正常培养条件培养辩亩晌。携锋

3、融书他基合瘤(hybridoma助存优华油应次)

有些hybridomacell需培养三天以上才会产生抗体,若是更换培养基,则可能会失去抗体。因此继代培养不需离心后更换培养基,直接添加新鲜培养基稀释细胞浓度即可。若体积太大,可倾斜放置,或分殖至新培养瓶中。

扩展资料:

代方法:

1、悬浮生长细胞传代

多采用离心法传代。1000转/分,20-30秒后去上清。沉淀细胞加新培养液后再混匀传代。亦有直接传代 法,即悬浮细胞沉淀在瓶壁时,将上清培养液去除1/2-1/3,然后用吸管直接吹打形成细胞悬液再传代.

2、半悬浮生长细胞传代(Hela细胞)

此类细胞部分呈现贴壁生长现象,但贴壁不牢,可用直接吹打法使细社煤化丰坚判委难距胞从瓶壁脱落下来,进行传代。

3负希省质写员胜行、贴壁生长细胞传代

采用酶消化法传代。常用的消怎伯画甚却答省化液有0.25%的胰蛋白酶液。

参考资料来源:百度百科耐察-传代培养


我来回答