tris hcl缓冲液酸性条件怎么配制

tris-hcl缓冲液的配制方法： tris：三羟甲基氨基甲烷 三羟甲基氨基甲烷（tris(hydroxymethyl)aminomethane，一般简称为tris）是一种有机化合物，其分子式为(hoch2)3cnh2。tris被广泛应用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备。例如，在生物化学实验中常用的tae和tbe缓冲液（用于核酸的溶解）都需要用到tris。由于它含有氨基因此可以与醛发生缩合反应 tris为弱碱，在室温（25℃下，它的pka为8.1；根据缓冲理论，tris缓冲液的有效缓冲范围在ph7.0到9.2之间。 tris碱的水溶液ph在10.5左右，一般加入盐酸以调节ph值至所需值，即可获得该ph值的缓冲液。但同时应注意温度对于tris的pka的影响。 由于tris缓冲液为弱碱性溶液，dna在这样的溶液中会被去质子化，从而提高其溶解性。人们常常在tris盐酸缓冲液中加入edta制成“te缓冲液”，te缓冲液被用于dna的稳定和储存。如果将调节ph值的酸溶液换成乙酸，则获得“tae缓冲液”（tris/acetate/edta），而换成硼酸则获得“tbe缓冲液”（tris/borate/edta）。这两种缓冲液通常用于核酸电泳实验中。 用途：有机合成中间体。在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系，稳定电泳过程中的ph值。在凝胶中也起到稳定ph的作用，只不过是tris-hcl缓冲体系。 tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂，还有许多重要用途。tris被用于不同ph条件下的蛋白质晶体生长。tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫（c. elegans核纤层蛋白lamin）的中间纤维的形成。tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。此外，tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。tris也被用作滴定标准物。 1 m tris-hcl (ph7.4，7.6，8.0) 组份浓度 1 m tris-hcl 配制量 1l 配制方法： 1.称量121.1 g tris置于l l烧杯中。 2.加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。 3.按下表加入浓hcl量调节所需要的ph值。 ph值 浓hcl 7.4 约70 ml 7.6 约60 ml 8.0 约42ml 4.将溶液定容至1 l。 5.高温高压灭菌后，室温保存。 注意：应使溶液冷却至室温后再调定ph值，因为tris溶液的ph值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的ph值大约降低0.03个单位。 1.5 m tris-hcl (ph8.8) 组份浓度 1.5 mtris-hcl 配制量 1 l 配制方法 1.称量181.7 g tris置于1 l烧杯中。 2.加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。 3.用浓hcl调节ph值至8.8。 4.将溶液定容至1 l。 5.高温高压灭菌后，室温保存。 注意：应使溶液冷却至室温后再调定ph值，因为tris溶液的ph值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的ph值大约降低0.03个单位。 te即tris-edta buffer（10mm tris，1mm edta，ph7.4 ph7.6 ph8.0）。 常用分子生物学试剂，用于dna的溶解等。 配制1 0×te buffer (ph7.4, 7.6，8.0) 组份浓度： 100 mm tris-hcl，10 mm edta 配制量： 1 l 配制方法： 1. 量取下列溶液，置于l l烧杯中。 1 m tris-hcl buffer(ph7.4，7.6，8.0) 100 ml 500 mm edta(ph8.0) 20 ml 2.向烧杯中加入约800 ml的去离子水，均匀混合。 3.将溶液定容至1 l后，高温高压灭菌。 4.室温保存。