求实验设计 分离乳酸菌 乳酸菌发酵豆浆

乳酸菌的分离纯化 分离 （1）配制BCG牛乳培养基，分装三角瓶，包扎，灭菌备用。 BCG牛乳培养基配制 A溶液：脱脂乳粉100g,水500ml，加入1.6%溴甲苯酚绿（BCG）乙醇溶液1ml，80℃灭菌20min。（1.6%溴甲苯酚绿（BCG）乙醇溶液用1.6g溴甲酚绿加入20ml无水乙醇中，再加水至100ml制成）,121℃湿热灭菌20min。 B溶液：酵母膏10g，水500ml，琼脂20g，PH6.8，121℃湿热灭菌20min。 以灭菌操作趁热将A溶液和B溶液混合均匀后倒平板。 （2）样品的处理 按照无菌操作要求，从市售新鲜酸乳中吸取10ml检样，放入装有90ml无菌水的三角瓶内，振摇混匀。 （3）分离方法 ①倒培养基 在无菌室，先用紫外线照射半小时把表面菌灭了，在通风10min后，每培养皿倾注约15ml左右已溶化的BCG牛乳培养基，立即放在桌上摇匀，冷却凝固后即成平板。 ②十倍稀释法 将检样充分摇匀后，用十倍稀释法稀释成10-1、10-2、10-3、10-4、10-5各种稀释度的样品液。 ③分离 直接用接种环蘸取10-3,10-4、两个稀释度的试管中原液，在BCG牛乳培养基琼脂平板上划线分离，每稀释度做两个平皿。置40℃培养箱中培养48h。如出现圆形稍扁平的黄色菌落及周围培养基变为黄色者初步定为乳酸菌。