海洋中的发光细菌具独特的生理特性，可作为环境监测的指标生物．Ⅰ．现利用发光细菌对海水重金属污染状况

海洋中的发光细菌具独特的生理特性，可作为环境监测的指标生物．Ⅰ．现利用发光细菌对海水重金属污染状况进行监测，请完善下列实验设计和推导实验结论．实验原理：细菌代谢正常时，发光强度稳定；当重金属影响到其代谢时，发光会受到抑制，抑制程度用抑光率（发光被抑制的百分率）表示．实验材料：明亮发光杆菌冻干粉、待测海水水样、2%NaCl溶液、3%NaCl溶液、荧光分光光度计（用于测定细菌发光强度）、试管等．实验步骤：（1）将少许明亮发光杆菌冻干粉和0.5mL 2%NaCl溶液加入5mL小试管中，摇匀配制成发光菌悬液；然后按照下表配制海水样品稀释液．请在“-”上填写①②③④分别代表的数据．组别123453%NaCl溶液（ml）①______4.744.494.243.99海水样品（ml）②______0.250.500.751.00发光菌悬液（ml）③______0.010.010.010.01混合液中海水浓度④______0.050.100.150.20（2）各试管静置15min后，用荧光分光光度计测定______．（3）计算各组相对抑光率．若计算第3组的相对抑光率，则计算公式为T%=______实验结论：（4）如果测得上述各组相对抑光率如下，可以判断待测海水样品______．组别12345相对抑光率（%）06131723Ⅱ．请回答下列问题：（5）细菌的发光反应是在氧的作用下，胞内荧光酶将脂肪醛氧化为脂肪酸，同时释放出蓝绿光的过程．上述实验需要控制温度在l8℃进行，若超过25℃实验很难进行，这是因为______．（6）发光细菌的发光基因表达直接表现为生物发光，非常直观而且易于检测，所以发光基因是基因工程操作上很好的______基因．（7）对发光细菌纯化、培养常用______法接种（只需答一种）．培养结束后，对使用过的培养基应进行______处理．