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第40卷第10期2015年10月
贵
阳
医
学
院
学报
V01．40
No．10
JOURNALOFGUIYANGMEDICALCOLLEGE
2015．10
双荧光mRFP—eGFP—LC3体系在细胞自噬中的作用
黄桢钧，刘
［摘
爿：
彬，刘本荣，刘少军
510260）
（广州心血管疾病研究所广州医科大学附属第二医院心内科，广东广＇kl’l
要］目的：探讨双荧光mRFP—eGFP—LC3（ptfLC3）体系在细胞自噬中的作用。方法：采用不同浓度雷帕
000
霉素（50、100、200、500、1
nmol／L）处理人胚肾细胞（HEK293），蛋白印迹法检测不同浓度雷帕霉索组中自噬
标记蛋白（LC3蛋白）的表达及LC3一II／LC3一I比值；单荧光GFP—LC3质粒和双荧光mRFP－eGFP－LC3质粒转染HEK293细胞，雷帕霉素（200nmol／L）处理3h，采用荧光显微镜统计，并比较两种方法转染后HEK293细胞内LC3亮点的变化。结果：不同浓度雷帕霉素处理HEK293细胞，LC3一II蛋白和LC3一II／LC3・I比值均增加；转染GFP．LC3质粒时，雷帕霉素处理HEK293细胞中绿色亮点的数量增加；转染mRFP—eGFP．LC3质粒时，雷帕霉素处理HEK293细胞中绿色和红色亮点数量均增加。结论：双荧光mRFP—eGFP—LC3体系优于单荧光GFP—LC3体
