如何评价真菌血清学检测

第一：检测血清或肺泡灌洗液中的1,3-β-D葡聚糖，也称G试验或鲎试验，目前已有商品试剂盒。1,3-β-D葡聚糖是多种不同种类真菌细胞壁的共有成分，此物质可特异性激活鲎的协同凝集酶G因子，发生凝固蛋白原转变的级联反应从而引起吸光度变化，检测该成分可用于对系统性真菌病的筛选，可区别真菌感染和定植，阳性结果较真菌感染的临床和影像征象出现早2-10天，有助于早期诊断，且与症状消长呈正比。缺点是不能区分真菌种属，不能检测结合菌和隐球菌，且存在较多干扰因素：如输注某些静脉制剂（白蛋白、免疫球蛋白，凝血因子）；应用纤维素膜进行血液透析；应用某些药物，如抗肿瘤药物，磺胺类药物以及链球菌败血症患者，可出现假阳性。因此在我国《血液病/恶性肿瘤患者侵袭性真菌感染的诊断标准与治疗原则》 指南中指出至少连续2次G试验呈阳性，同时结合患者临床表现，才具诊断意义。
　　
　　第二：半乳甘露聚糖是存在于曲霉和青霉细胞壁的一种多糖，随着霉菌生长会释放到外界，检测血清或肺泡灌洗液中的曲霉半乳甘露聚糖，也称GM试验，灵敏度高（1ng/ul），目前有商品试剂盒，检测方法是微孔板双抗体夹心法（double-sandwich）。GM试验的优点是可以区别真菌感染和定植，阳性结果早于临床症状和影像学异常，敏感性和特异性高于G试验，可判断疗效和预后，特别是在粒细胞减少、血液病、骨髓移植后免疫抑制的患者中诊断意义较大；缺点是不能区分曲霉菌种，存在一些干扰因素，如新生儿和幼儿患者、多发性骨髓瘤患者和静脉输注免疫球蛋白等，均可造成假阳性，因此需多次检测且连续2次阳性才具诊断意义。
　　
第三：新型隐球菌循环荚膜抗原测定已成为诊断新型隐球菌病，尤其是新型隐球菌脑膜炎的重要手段，对于隐球菌病而言，脑脊液和血液是最有价值的标本，但在两种标本中测定的抗原滴度可不平行。乳胶凝集试验10分钟内即可出结果，特异性90%以上，远高于脑脊液墨汁染色镜检（50%）和真菌培养（70%）的阳性率。特别需要注意的是，检测脑脊液标本时可能会因为抗原量过高而出现假阴性，此时应作1：50或1：100的稀释。