请问自制脾细胞增值实验怎么做?
要有详细的步骤,和需要的仪器。如所用试剂如何配置呢?配置不了从哪买呢?哪个公司的好?总之越详细越好~~谢啦我只有20分,全都送出去了,只要答得好~~先谢过MTT法小鼠脾淋巴细胞增殖... 要有详细的步骤,和需要的仪器。如所用试剂如何配置呢?配置不了从哪买呢?哪个公司的好?总之越详细越好~~谢啦我只有20分,全都送出去了,只要答得好~~先谢过MTT法 小鼠脾淋巴细胞增殖 实验 谢谢 回答者耐心的回答,但可能我问题陈述的有问题,答的不完全是我要的。MTT法我会做,但小鼠脾淋巴细胞增殖实验在做MTT之前要怎么做呢?我之前没做过,希望给出详细的操作步骤和注意事项,谢啦~~你应该是做过,只要按你写的我能做出来,就立刻把分给你 谢谢 展开
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回答者:网友
(1) 细胞数量减少,在文献和我们自己的实验中,常采用每孔细胞为1×105个。
(2) 我曾360问答采用Sigma公司的产表乙慢纪六十品,终浓度5ug/ml。
(3) 采用BALB/C鼠,因为BALB/C比较纯,得到的结果一致性也好。
(4) 接种细稳常胡承晶胞之前进行台盼兰染色计算活细胞数,从而心中有底与原笑垂单。
(5) 不需要正交实验考查几个影响因素的最佳组合,因为MTT测定淋巴细胞增殖已是先人多次摸索实验得出的实验条件。
(6) yunnandali战友没有给出测定波长,一般实验中采用570nm作为测定波长,630nm作为参比波长。
(7) 还有你的药物本身是什么类型的,估计它本身与刀豆蛋白发生反应的可能性不是很大。
(8) 实验中,我建议能对细胞体系进行离心的话,还是尽量孩附载苏黑通沿半离心,因为淋巴细神却买宣罪进钱复攻度统胞是悬浮的。我们的实验中,在加入MTT之前,首先离心一下,吸出一些上清(保持培养体系始终是相同体切以引班积),继续孵育4h后,再离心学放所都洋坚也绍础用(甲簪完全沉到底部),然后轻轻将上清弃去(倒转96孔板,轻拍。不过我怕将甲簪拍出来,一见环般还是使用移液枪血林审课更孙备将上清全部吸出)。
(9务积井也移) 我还是不能明白你的发帖题目的意思——“药物刺激小鼠脾淋巴细胞增值”(非林烧米虽非黑增值,是增殖),我们的免疫药理学实验中一般是考虑药物对丝裂原刺激的传的神重守线什淋巴细胞增殖的影响,如果你想考察药物本身对淋巴细胞留复苏很逐增殖的刺激能力,应该使用ConA作阳性对照才是,但是你的实验不是这样。估计你还是想观察药物对ConA作用下淋巴细胞增殖能力的影响作用。
(10) 将你的实验再重复几次,看看结果是不是一直都是这样。