细菌内毒素检测(凝胶法)标准操作
目的:规范细菌内毒素的检测操作,保证细胞质量。
范围:适用于所有从治疗中心发放的细胞(包括CIK、DC、干细胞等)内毒素限量检测。
责任人:质量检测人员
材料:
一、电热干燥箱 除外源性内毒素用,温度应能达到180℃。
二、恒温水浴箱或适宜的恒温器(37℃±1℃)。
三、水银温度计,精度在1℃以下,量程不小于50℃。
四、旋涡混合器。
五、可调式移液器
六、0.25EU/ml鲎试剂。
七、细菌内毒素工作品。
八、凝胶法细菌内毒素检查用水。
九、实验用具 无热原吸头(1000μl、200μl)、带铝盖的凝集管(10mm×75mm)、试管架、计时器、75%酒精棉球、封口膜、剪刀、镊子、砂轮。所用玻璃器皿使用前须经250℃干烤至少1小时或180℃干烤至少4小时。
操作方法
一、取样
1、细胞发放前3天,取细胞培养液约2ml,分装于2个带铝盖的凝集管中各约1ml左右,如不立即试验4℃存放(可存放多长时间)。
2、细胞发放当天,取细胞生理盐水混悬液约2ml,分装于2个带铝盖的凝集管中各约1ml左右,如不立即试验4℃存放。(可存放多长时间)。
3、取样应以无菌操作技术取样,所用器材在使用前应无热原或已去除热原。
二、鲎试剂灵敏度复核
鲎试剂灵敏度复核的目的是考察鲎试剂的灵敏度是否正确2(二)实验操作当1