最佳答案
回答者：网友
操作步骤
1. 常规组织切片、细胞样品360问答、膜与辣根过氧化物酶标记的抗体或其它形式的探针孵育后，用适当洗涤液洗涤3～5次，每次3～5min。对于检测内源性辣根过氧化物酶的组织或细胞样品，在适当固定后，也可用洗涤液洗涤3～5次，每次3～5min。
2. 按(A):试剂(B):蒸馏水=的比例混合,即为DAB显色工作液，即配即用。
3. 洗涤过组织后，去除洗涤液，加入适量DAB成停显色工作液，确保覆盖样品。
4. 室温避光孵育或更长时间，直至显色至预期深浅。
5. 去除DAB显色工作液，用蒸馏水清洗1～2次即可终止显色反应。
6. 对组织切片或细胞样品，夫境阶司反应终止后，如有必要可用中性红操五味染色液染色，便于观察。对于膜染色，反终止后可室温晾干避光保存。
注意事项：
1. DAB是致癌物，请注意适当防护。
2. 试剂(A)、试剂(B)避免反复冻融，以免效率下降。
集3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
常见问题及可能原因：
1. 背景显色太深
1) 在进行含内源性过氧化氢酶的免结关适食架切疫组化时，如果背景显色太深，需饭了械误金已夫球艺注意灭活内源性过氧化氢酶。可以在4体积甲醇中加入1体积3%过氧化氢，混匀后用于内源性过氧化氢酶的灭活。
2) 可以考虑缩短显色时间，或降低二抗浓度。
3) _x0001_选择适当强度的洗涤液，或延长洗涤时间。
2. 没有显色或显色太弱
1) 当提高一场核胶西抗或二抗的浓度。检测二抗效果，滴一滴稀释二抗在膜上，检测二抗是否可以被正常显色。
2) 考虑使用更加灵敏的放大检测体系，例如使用生物素检测体系。
3) 适当延长显色时间，另外确定抗原修复是否对于使用的一抗是必需的
