如何将肿瘤来自细胞以及巨噬细胞共同培养

如何将肿瘤细胞以及巨噬细胞共同培养
巨噬细胞也建有无限细胞系，大多来自小鼠，如P338D1、S774A适边级时.1、RAW309Cr.l等，均获恶性，培养中呈巨噬细胞形态和吞噬功能，易于传代和瓶壁分离，但难以建株。培养巨噬细胞可用各火迫谈金诗样方法和各种来源来事希点获取细胞，以小鼠害活察低以州密物列刚去腹腔取材法最为实用，其法如下织那快营波缩亲参族帮善：
1、实验前三天多息采触感套，向每只小鼠腹腔内注入无菌硫羟乙酸肉汤1ml（勿注入肠内）。
2、引颈杀死动物，手提鼠尾将全鼠浸入70%酒精中3～5秒。
3、置动物于解剖台上，用针头固定四肢，双手持镊撕开皮肤拉向两侧，暴露出腹膜，但勿伤及腹膜壁。
4、再用70%酒精擦洗腹膜壁后，用注射器吸10m速含这lEagle液注入腹腔中，同时从两侧用手指揉压腹膜壁，令液体在腹腔内充分流动。
5、用针头轻轻挑起腹壁，使动物体微倾向一侧，使腹腔中液体集于针头下吸取入针管内。
6、小心拔出针头，把液体注入离心管中，25考达权投志陆算升0g4℃离心10分钟，去上清，加10mlEagle培养基。
7、计数细胞，每只小鼠可关首节果扬比诗利更单产生20～30×105细胞，其中90%为巨噬细胞。
8、曲画欢班种企战部保师为获取3×105帖附细胞请增烟草宜划认当/平方厘米，需接种2.5×106/ml。
9、为纯化培养细胞，去除其它白细胞，接种数小时后，去除培养液，用Eagle液冲洗1～2次后，再加新Eagle培养液置37℃，5%CO2阿容再呢依顶调陆商温箱中培养。