传代细胞培养前谓雷械支钱事火具,简述传代和换液后来自培养细胞的变化?

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细胞换液:随着细胞培养时间的的延长,培养基中的营养物被消耗,细胞的代谢产物愈来愈多,尤其是细胞呼吸反应释放出的CO2及其它酸性代谢产物的增加,培养液的pH值越来越低,培养液的颜色越来越黄。此时就需要对细胞进行换液。换液时吸掉旧培养液,用PBS 洗涤细胞一至二次,加入适量的新鲜培360问答养基即可。

细胞传代:随着培养时间的延长和细胞不断分裂,细胞之间相互接触而发生接触性抑制足部若航怎规走,生长速度减慢甚至停止。此时就需要将培养皿(瓶)中的细胞分足乱宗事成几份,重新接种到另外的培养器皿(瓶)内眼白食保型,再进行培养,这个过程就称为传代

传代步骤:

1、吸掉旧培养液,用PBS 洗涤细胞一至二次。

2、加入trypsin-EDTA 溶液,37 度作用数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量含血清的新鲜培养基终止trypsin作用,离心后再吸掉上清液。

3、加入适树谈导居则刑边种全片量的新鲜培养基,以吸管上下吸放数次以打散细胞团续席龙是轴跑知希气民块,混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶中,以正常培养条件培养。



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