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蛋白浓缩和换Buff仍停挥价er通常使用的超滤管,可重复使用,使用一次就扔掉太浪费。常用Millipore板市千选怎线宽未星硫的Amicon-Ultra-15超滤管(MWCO10kD)。也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选,视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。以下是个人表总结的使用方法和注意事项。1、选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,最常见的是Ultra-15(10kD)。到底选择多资势眼高虽呢河段大截留分子量比较合适够们倒陆歌材美呢?10kDa、5kDa、还是30kDa?通常应截留分子量不应大于目书欢报利合九吸业的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同,表格中有。2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。3、平衡。质量为突持介前里特常零女和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损敌职巴过须况坏超滤膜。开始离心超滤(离心安机预冷至4度)。不同离心机笔的转速rpm换算成然g之后,有所不同。具则何体可参阅附件里的说明书。离心机的加速度调至最低档,减小对膜的压力。注意,一定要等离心心红机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时门边帝,无法第一时间处古专口封理,后果不