碧云天公司Western 及IP 细胞裂解液提取蛋白,加100微升到6孔板,蛋白终浓度大概多少??

碧云天公司技术支持Western及IP细胞裂解液肿瘤细胞6孔板培养,比如Hela细胞,一孔加100微升裂解液,最后蛋白浓度大概能是多少??我总觉得我的浓度很低呢... 碧云天公司技术支持 Western 及IP 细胞裂解液 肿瘤细胞6孔板培养,比如Hela细胞,一孔加100微升裂解液,最后蛋白浓度大概能是多少?? 我总觉得我的浓度很低呢 展开
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虽然没用过碧云天的,我个人建议啊,稍微取一点样品出等钟财来做一个蛋白浓度测定,例如用Nanodrop什么的,只用个几微升。不然所有的判断都没有基土上团草基父田染础,感觉有时候挺骗人的。
或者是弄点出来跑电泳,看看药皮浓检矿吗项胶上的情况。
如果担心裂解效率低,可以多加裂解液,但是这样的话,蛋白浓度会更低的。
你如果是因为IP没有条带而觉得浓度低的话,建议做WB,或者是多弄几个孔的样品做一个IP再看。因为Ip不仅和裂解有关,还和抗体的结合误宪史海系甲能力和特异性都有关系,不好判断的。

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