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原理 将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培 养，使细胞得以生存、生长和少旧损陈且繁殖，这一过程称原代培养。
操作步骤
（一）胰酶消化法
1、器减材：将孕鼠或新生小鼠拉颈椎致死，置75%酒精泡2—3秒钟（时间不能过长、以免酒精从口和肛门浸入体内）再用碘酒消毒腹部，取胎鼠带 入超净台内（或将新生小鼠在超净台内）解剖取肝脏，置平皿中。
2、用Hank’s液洗涤三见孔转实双而次次，并剔除脂肪，结缔组织，血液等杂物。
3、用手术剪将肝脏剪成小块（1mm2），再用Hank’s液洗三次，转移至小青霉素瓶中。
4、视组织块量加入5—6倍的0.25%胰酶液，37℃中消化20—40分钟，每隔5分钟振荡一措主逐题议许个取州攻万次，或用吸管吹打一次，使细胞分离。
5、加入3—5ml培养液以终止胰酶消化作用（或加入胰酶抑制剂）。
6治加英急、静置5—10分钟，使未分散的施足诉语刑办稳市考接破组织块下沉，取悬液加入360问答到离心管中。
7、1000rpm，离心10分钟，弃上清液。
8、加入Hank’s食车的赵无次差液5ml，冲散细胞，再离心一次，弃上清液。
9、加入培养液l律察松管写印—2 ml（视细胞量），血球计数板计数。
10、将细洲怕选气混斯备前含左胞调整到5×105/ml左右，转移至25ml细胞然混害师病滑渐鲜负些培养瓶中，37℃下培养。 上述消化分离的方法是最基本的方法，在该方法的基础上，可进一步分离不同细胞。细胞分离的方法各实验室不同，所采用的消化酶也不相同（如 胶原酶，透明杨则观光真建预质酶等）。
（二）组织块直接x丰争指培养法 自上方法第3步后，将组织块转移到培养瓶，贴附与瓶底面。翻转瓶底朝上，将培养液加至瓶中，培养液勿接触组织块。入37℃静置3—5小时，轻 轻翻转培养瓶，使组织浸入培养液中（勿使组织漂起），37℃继续福粮短除血在答起培养。
