变性胶跑RNA使结果尽量准确
1、两种方法的原理
非变性胶:常用TAE或者TBE都是可以的,它是利用核酸分子带电随着电来自流电子移动而移动。
变性胶:一般是在配制凝胶的时候使用甲醛变性的MOPS配制的胶,实验前会72度孵育2~360问答3min,4度遇若响临唱础冷之后再跑胶,旨在将RNA的路洲训善二级结构打开,能够得到准确的实验结果。
2、两种方法的优缺点
非变性胶:操作相对简单,配胶成分较少,节省时间,成本较在情尽耐供星冲这丝时低。变性胶:结果较非接洋计妈格普静态第又决变性胶更真实,避免二级及其他结构导致的误判现象,但电泳缓冲液需勤换,操作相对复杂一点,成本变高。3规径价位乎、总结
其实两种方法都是可以用来跑RNA的,但对于原始的琼脂及越本则于之德已糖胶来说,无论是非变性胶还是变丝兵装镇它量性胶,RNA的完整性都是根据我们的经验来读取的,存在较大的偏差,此时两种方法在意义上是相同的,不够准确,既不能定性也不能布击州定量。4、优化步骤
RNA的提取占据了很大的权重,抽提过程保证了RNA是否能够很好的洗脱下来。要避免rnase酶的影响。建议为面体答离鱼医结超使用较先进的方法,比如2100,或者agilent 4200,既能定了量也能定性。是目前公认感通季件丝比右社规的标准。