细胞传代 现有3板(d=10cm的培分写养皿)MT1细胞,要传成10板,那么传代的比例

细胞传代现有3板(d=10cm的培养皿)MT1细胞,要传成10板,那么传代的比例要怎么计算?按照几比几的比例?还有在弃去胰液后要加多少培养基打散细胞?... 细胞传代 现有3板(d=10cm的培养皿)MT1细胞,要传成10板,那么传代的比例要怎么计算?按照几比几的比例?还有在弃去胰液后要加多少培养基打散细胞? 展开
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不是同一种操作。
细胞换身罗划技研液:随着细胞培养时间的的延长360问答,培养基中的营养物被消耗,细胞的代谢产物愈来愈多,尤其是细胞呼吸反应酸钱与前对殖回激纪脱释放出的CO2及其它酸性代谢产物的增加,培养液的pH值越来越低,培养液的颜色越来越黄。此时就需要对细胞进行换液。换液时吸掉旧培养液,用PBS 洗涤细胞一至二次,加入适量的新鲜培养基即可。
细胞传代:随着培养时间的延长和细胞不断分裂,细胞之间相互接触而发生接触性抑制,生长速度减慢甚至停止。此时就需要将培养皿(瓶)中的细胞分成几份,重新接种到另外的培养器皿(瓶)内,再进行培养,这个过程就称为传代。
传代步骤:
1、吸掉旧培养液,用PBS 洗涤细胞一至二次。
2、加入trypsin-EDTA 溶液,37 度作用数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量含血清的新鲜培养基终止tryps且法染也发夫席如胞in作用,离心后再吸掉上清液。
3、加入适量的新鲜培养基,以吸管上下吸放数次以打散细胞团算许故块,混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶中,以正重力移慢操村压灯问啊常培养条件培养。

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