细胞免疫荧光，求助

1，检查抗体是否过期，保存方法是否正确，稀释比例是否正确。
2，抗体的孵育时间、温度是否正确。
3，洗涤液中是否含有triton-100等破膜物质。
4，洗涤时间是否过长。
5，排除所有人为因素，考虑该细胞可能确实不般赶西术代题送伟告表达该蛋白。