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正相色谱和反向色谱及C18柱子
反相与正相的
区别在于,固定相与流动相的极性大小。反相:固定相的极性小于流动相的
极性正相:固定相的极性大于流动相的极性
反向色谱流动相极
性大于固定相极性测定样品时极性大的先出峰,正向反之
在正相色谱中,一般采用极性键合固定相,硅胶表面键合的是极性的有机基团,键合相
来自的名称由键合上去
的基团而定。最常用的有氰基(-CN)、氨基
360问答(-NH2)、二醇
基(DIOL)键合相。流动相一般用比键合相极性小的非极性或弱极性有
机溶剂,如烃类溶剂,或其中加入一定量的极性溶剂(如氯
燃突收跳对弦属收积元局仿、醇、乙腈等),以调节流
道讲计铁试鲜再凯河演动相的洗脱强度。通常用于分离极性化合物。一
器倒放持例连望海般认为正相色谱的分离机制属于分配色谱。组分的分配比
K值,随其极性的增加而增大,但随流动相中极性调节剂的极性
增大(或浓度增大)而降低。同时,极性键合相的极性越大,组分的保留
值越大。该法主要用于分离异构体,极性不同的化合物,特别是用来分离不同类型的
化合物。反相键合相色谱法在反相色谱中,一般
采用非极性键合固定相,如硅胶-C18H37(简称OD
S或C18)硅胶-苯基等,用强极性的溶剂为流动相
善艺地判制满,如甲醇/水,乙
腈/水,水和无机盐的缓冲液等。目前,对于反相色谱的保留机制还没有一致的看法,大致有两种观点:一种认为属于
分配色谱,另一种认为属于吸附色谱。