我要做流式.自己表达的抗原蛋白,要通过sulfo-smcc与微球偶联后,用来检测抗体.
自己表达的抗原蛋白,要通过sulfo-smcc与微球偶联后,用来检测抗体.但是自己表达的抗原(此抗原为衣壳蛋白)不稳定,不知道是聚沉了还是降解了,要保持它的稳定性,我该加什么?要价的东西还不能与sulfo-smcc偶联?
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回答者:网友
你是准备把抗原,smcc和微球一起加进去吗?还是分步进行的?如果抗原这么不稳定,能不能先把smcc和微球连起来,处理好以后,再加入抗原呢?
不知微球上使用的是什么基团?是氨基还是巯基?
如果用的是巯基连接抗原,可能要考虑抗原在还原状态下生物学活性是不是受影响。也就是可能不稳定不是由于抗原本身造成的,而是由于偶联的缓冲体系造成不稳定,或者是偶联过度导致抗原失效。更换一下偶联的比例,例如降低交联剂的用量等。
有更详细的实验信息,才能知道问题出在哪里。