求助:小鼠染色体制备的方法

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小鼠染色体制备的方法:

1.取雄性小鼠以每克体重4μg注射秋水仙素,经14~16小时后,断头法杀死小鼠,取出睾丸用生理盐水(0.9%的NaCl溶液)洗去血污。  

2.将睾丸放入装有1ml 0.3%KCl低渗溶液的小烧杯中剪碎至呈乳白色。 3.用铜网过滤到玻璃刻度离心管中来自,再加0.3%KCl缓冲溶液有其增日队至4ml。 

4.静置30min,进行低渗处理。  

5.以800~1000r/min的转速离心8min。  

6.取出离心显游怕右滑卫故管,弃去上清液,加入2ml固定液(甲醇:冰醋酸=3:1),并用吸管   至管底吹气,轻轻井口汉一映者流速手打散细胞,固定8min。 

7.再以800~1000r/min转速离心8min。 

 8.弃上清,加入1ml固定液,再制成细胞悬液,固定垂很为卷谓父5min。 

9.取洁净的低温预冷载片,距载片10~15cm高度滴下2~3滴细胞悬液,从载片一边向另一边轻轻吹气,同时轻轻敲打载片,以使细胞均匀分布和促使染色体展开。

 10.用滤纸擦去载片上多余液体,空360问答气干燥或成文火干燥。


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