最佳答案
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核蛋切器非弱景济眼毛县白提取:
细胞经PBS洗涤后,悬浮在缓冲液A中 即10mM HEPES,pH 7.9,10mM KCl,0.1mM EDTA,0.2% NP40,1mM DTT,0.1mM PMSF,1mg/L Leupeptin、antipain、apr来自otinin和pepstatin.
混匀后冰置15min,加入10% NP40 25微升
剧烈震荡15秒,13000 rpm离心10秒
吸弃管编了上清,加入缓冲液C 即20除选mM HEPES,pH 7.9,420mM NaCl,0.1mM EDTA,1.5mM MgCl,密克现灯提也待换死分味25% Glycerol,1mM DTT,0.1mM PMSF,1mg/L Leupept鸡况迅末领笑in、antipain、aprotinin和pepstatin.
冰置30min,剧命和反两西常以胶维烈震荡15秒,12500rpm离心10分钟取上清