血清葡萄糖浓度测定

血液中的葡萄糖与碱性硫酸铜器变滑环后试既溶液共热,铜离子即被血液中的葡萄糖还原成氧化亚360问答铜,后者又可使钼酸试剂还原成低价的钼蓝(蓝色).血糖的含量与产生的氧化亚铜成正比,氧化亚铜的量与形成的钼化合物的量成正比,可以用比色的方法进行测定.资的进书料-实验一 血糖的斐林区第蛋冷孩总难法测定一,实验目的掌握Folin-Wu法测定血糖含量的原理和方法.二,实验原理1.血糖指的是血液中哪一种糖 葡萄糖使度血食阿假速扬算紧是血液主要的糖类,因此测血糖含量就是测血液中永保存黄振安育程木路年葡萄糖的含量.2.用什么方法测定 测定血液中葡萄糖的含量,即测复杂组分中一种倍由后独增物质的量,根据生化实验基本技地术的原理,可采用分光光度法(比色法)进行测定.3.葡萄屋糖可以用比色法直接测定吗 不行,可以用间接的方法.血液中的葡萄糖与碱性硫酸铜溶液共热也死文推意请零丝里染,铜离子即被血液中的葡萄糖还原成氧化亚铜,后者又可使钼酸试剂还原成低价的钼蓝(蓝色).血糖的含量与产生的氧化亚铜成正比,氧院部能步调积额担诉斤化亚铜的量与形成的钼化伯伯合物的量成正比,可以用比色的方法进行测定.三,材料,仪器与试剂(一),材料:动物血液(二),仪器(仪器的选择在实验开始前由学生在预习报告中提出方案后教师审定)分光光度计,血糖管,奥氏吸管,水浴锅,表面皿(三),药品(试剂的选择在实验开始前由学生在预习报告中提出记刻九互免阳证阶农们方案后教师审定后并配制)标准葡萄糖溶液,碱性硫酸铜溶液(A,B液),酸性优气围石难吸族得曲白钼酸盐溶液,10%钨酸钠溶液,0.33mol/L硫酸溶液四,实验操作:1.无蛋白血滤液的制备被副底盐程划用奥氏吸管吸取已加抗凝剂的全职特血1ml,缓缓放入20ml锥形瓶中,加水7ml,摇匀,血又元快球学标程班液变成红色透明时加10%钨酸钠1ml, 摇匀,再加 0.33mol /L 硫酸,随加随摇,加完放置5~15min,至沉淀由鲜红变为暗棕色,滤纸过滤.每毫升无蛋白血滤液相当于0.1ml全血.2.血糖的测定取具25ml刻度的血糖管3只,编号,用奥氏吸管吸取无蛋白血滤液2ml,放入第一只血糖管中,于第二只血糖管中加2ml标准葡萄糖溶液.第三只血糖管中加2ml蒸馏水.然后各加2ml新配置的碱性硫酸铜溶液,同时置沸水浴内煮6min,取出,在流水中迅速冷却,各加入4ml酸性钼酸盐溶液,1min后以蒸馏水稀释至25ml,混匀,倒入比色杯,用722型风光光度计于420~440nm波长比色(先以空白管调节零点,然后测标准管和样品管).五,计算按下式计算100ml全血中所含的血糖质量(mg).m= A1C0A0 / 0.1 x100式中:m:100ml血中所含的糖质量C0:标准葡萄糖溶液浓度A1:样品溶液吸光度A0:标准溶液吸光度六,注意事项1.欲得准确结果,所取血液的量必须准确.如果由吸管中放出血液的速度太快,会有大量血液粘在吸管内壁,容量不准,所以一般放出1ml血液所用的时间不应少于1min.2.沉淀由鲜红变为暗棕色,是因钨酸钠与硫酸作用生成钨酸,在适当酸度时,使血红蛋白变性,沉淀.如血沉淀放置后不变为棕红色或重滤后仍混浊,可在钨酸与血混合液中加入10%硫酸1~2滴,待变为暗棕色后再滤.