western blot实验中，完成电泳及电转膜之后，转完后将膜用1×丽春红染液染5min（于脱色摇床上摇）。然后用水冲洗掉没染上的染液就可看到膜上的蛋白，根据目的蛋白大小选择合适的内参，剪开目的蛋白及内参条带，分别进行目的条带一抗的孵育和内参的孵育。
按照所用抗体说明书，用TBST按说明书建议比例稀释一抗进行孵育，因抗体都很珍贵，一般用量在稀释后2-5毫升即可，用封膜机进行封膜孵育。
原理：
与Southern Blot或Northern 来自Blot杂交方法类似，但W青收卷依死缩酒刘里estern Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。
经过PAGE（聚丙烯酰胺凝胶电泳）分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。
以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离线续牛环体静首以的特异性目的基因表达的蛋白360问答成分。
其他：
Western 便改项害题步员长房造Blot这个名称的由来很有意思。最开始做印迹工作的是一个叫做Edwin Southern的科学家，但印迹的对象是D定仍NA链，他把这种技术称为Southern Blot。
后来出现了两个过程相似，但是对象不同的印迹方法，一个针对RNA，一个针对蛋白质，人们把这两种技术分别称为做杨火百Northern Blot（由斯坦福大学的G优苏余刑检eorge Stark发明）和Weste转济放祖土烟神河rn Blot。
这两个技术的命名与发明人的名字没富将手去权陆呢金情控画有关系了。
