细菌内毒素

请问细菌内毒素实验不成功，原因在哪?1.试验中直接都用的1ml移液管（是不是不够精确？）2.鲎试剂反应直接在原装平底安剖瓶中进行（是否必须要转移到无热原试管？）3.反应时间没有精确到1小时大概50min，（反应时间不够？）4. 鲎试剂和细菌内毒素原来是常温保存了，后来才放4度冰箱（在常温下发生变性？）5. 实验时无菌室温度达34度（实验环境是否会影响结果？）以上是我列举的的自己试验的不足，请大家指教

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回答者：网友

看你列出来的原因，你应该是没有按药典的规定来做凝胶法。 1、使用移液管没有问题，不是一次性塑料的吧？聚丙烯材料的会促进内毒素吸附； 2、鲎试剂反应直接在原装平底安剖瓶中进行，可以的； 3、反应时间没有精确到1小时大概50min，反应时间不够，应该是60＋2分钟； 4、鲎试剂和细菌内毒素原来是常温保存了，后来才放4度冰箱（在常温下发生变性，有可能。鲎试剂应该放置在避光，2~8度的环境）； 5、实验时无菌室温度达34度（实验环境是否会影响结果，有影响。室温一般控制在22~25度,34度鲎试剂的灵敏度，内毒素的效价都会有变化）你要按药典规定的条件进行试验。37度反应60＋2分钟