基因的克隆,转导,表达,在对目的基因PCR时,为什么一些人设计的上游引物不是从ATG开始的,而是从中上段开始

克隆基因的编码框时，必须从ATG开始或UTR处开始。当你想表达这个基因时，PCR产物必须包括完整的读码框；当你需要该基因融合GFP时，不仅需要从ATG开始，终止密码子必须突变掉，而且目的基因与GFP必须在一个读码框中。而需要监测目的基因的表达水平时，如果使用RT-PCR，则最好是从基因的中上段开始设计引物，因为在RNA提取时，可能得到的部分RNA有小部分降解，或反转录时，只反转录了一部分，没有到ATG这端，因此，从中上有设计的引物更容易监测到目的基因的表达。望采纳！