碧云天的苏木素伊红染色试剂盒好用吗
2016-10-21 发布 1
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网友
10/30/2018 16:53:34
好不好用,要用过才知道啊。 试剂盒说明: 苏木精-伊红染色法 ( Hematoxylin-Eosin staining ),简称HE染色法 ,是病理学常规制片中最基本的染色方法。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。 染色过程需要优化,着色情况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例如,很多细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。 本产品所包含试剂均为工作液,可直接使用。 操作说明(以下步骤仅供参考): (一)石蜡组织切片染色。 1.取材组织块,经固定后,常规石蜡包埋,切片。 2.石蜡切片脱蜡水化: 二甲苯(I)中脱蜡5min。 换用新鲜的二甲苯(Ⅱ),再脱蜡5min。 无水乙醇5 min。 95%乙醇2min。 80%乙醇2min 70%乙醇2min。 蒸馏水2min。 3.苏木素染液染色5-20min(具体时间根据染色结果和实验要求调整),自来水冲洗。 4.分化液分化30s。 5.自来水浸泡15min或温水(约50℃)5min。 6.置伊红染液2min(具体时间根据染色结果和实验要求调整),自来水冲洗。 7.自来水浸泡5min。 8.脱水,透明,封片: 95%乙醇(I)1min 95%乙醇(Ⅱ)1min ③100%乙醇(I)1min 100%乙醇(Ⅱ)1min 二甲苯石炭酸(3:1)1min 二甲苯(I)1min 二甲苯(Ⅱ)1min 中性树胶封固,镜下观察。 (二)冰冻切片 冰冻切片不用脱蜡,可固定后直接染色,其方法与石蜡切片相同。 注意事项: 1、切片脱蜡应尽量干净。 2、系列乙醇应经常更换新液。 3、第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。 4、染色过程推荐浅染,通常只需能够分辨细胞核即可,颜色过深有可能影响细胞质颜色。 5、冷冻切片染色时间尽量要短。 6、染色时的pH值很重要。苏木素中矾类,太少会使核染偏红,太多会造成染色弥散。需要严格按照配方进行配置。 7、放置时间过长的苏木素染液需要过滤后才能使用,否则容易造成分色效果不好。 8、如果染色效果不好,可以加适量的冰醋酸增强细胞质着色,该操作具有一定副作用,染好的片子会随着时间延长而褪色。 9、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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