镍柱纯化蛋白,为什么把所有流出液电泳,都没有看到蛋白条带啊?加入前得蛋白溶解液中已经电泳检测有蛋白

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回答者:网友
电泳检查你的流穿液,对比上样前的样品,确信蛋白石结合到柱上
你his-tag的包涵体蛋白,用尿素洗脱,其pH值是多少?需要用低pH;如果pH不够,极可能你的蛋白还在柱上。
此外,你有没尝试过柱上复性,以避免用尿素洗脱?

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