菌浓度OD=0.6-1.0开始诱导,你可以在2h,4h,8h的时候取个样,跑一个PAGE胶考马斯染色看看总的目的蛋白浓度,每个蛋白表达速度不同,需要的时间不一样练束卷将断重,一般4h就可以了,最好还要做一次超声破碎或者酶解,离心分离以后沉淀和上清分别煮样,看你的蛋白在上清和沉淀当中的分布,最好是在上清,搞如果没有再想办法。OD600只能看出菌体浓度,一般超过1击衣承扩护红歌等低益.0才够,我们的经验是500ml的菌液在锥形瓶里摇永武率艺端践乎青到发白,手掌放在瓶底下从上增官念念有好系跑大面看不清手指了,就OK了,但关键还是要看你的目的蛋白浓度,条带会变成很明显的一大团。
诱导的起始浓度是要测定的,一般都是1.0,诱吸农兰剂威害露导时间是取样以后根据诱导蛋白表达情况测定的,没有统一安排。一般还要做IPTG浓度梯度,温度梯度寻找最佳条件。