当质粒转化进大肠贵可减似距多学仅杆菌时,通过DNA复制原理表达目的基因。 CaCl2对特定的大肠杆菌处理,制备感受态的细菌。这些细菌可使每微克超螺旋质粒DNA,如一些插入目季展识罪的DNA片段的重组质粒,产生5×106~2×107 个转化的菌落妒物掌案另服棉由上降。当质粒与这些大肠杆菌混合后,质粒粘附在大肠杆菌的表面,在42℃的温度时,诉树大肠杆菌出现热休克,质粒可通过大肠杆菌细胞膜上形成部苗益阻括术的空隙进入菌体内。随后,加入LB培养液,于37℃振动培养可使细菌复苏,并且表达质粒编码的抗生素抗性基因,提高转化效率。转化成功的大肠杆菌可以在相应抗生素培养皿中传代,形成菌落。 由于大肠杆菌繁殖快,在适宜的条件下繁殖一代仅需要20~30分钟,而且常用质粒可