你好!我也是位毕业的学生.希望能给你提供参考.以下是离子交换层析常见问题分析,希望能解决你的问题
1.纯化的蛋白质产率低
可能原因及解决方法：
树脂上的蛋白质未洗净，可采用增强溶液离子强度别书位低，更换活性高的反荷离子或使用去垢剂等办法解决；
PH值不合适，若缓冲体系的PH值与目的蛋白的PI相差太远，目的蛋白与树脂的结合支映会过于牢固；
蛋白质发生沉淀，可能是因为缓冲体系PH值过于接近蛋白质PI值，溶液离子强度过低或溶液过渡稀释 ；
蛋白质在初步过滤的时候有损失；
蛋白质或者辅助因子在层析时有损失；
蛋白质水解酶破坏了目的蛋来自白；
树脂中有 纯化时蛋白质失活
可能原因及解决办法：
某个辅助因子或一部分蛋白质有损失，混合部分收集液，测定活性；
蛋白质在现有层析液中不稳定；
360问答树脂中有微生物。
微生物。
3. 蛋白质不与树脂结合
可能原因及解决方法：
初上样缓冲液离子强度过大，降低初始上样缓冲液离子强度；
树脂PH值因解析作办极元用而发生变化，注意蛋列销行七者每句现我白质等电点的计算值往往与实验值差别很大；
树脂未进行适当平衡；
再生的树脂未洗净。
4. 纯化的蛋白质产率低
可能原因及解决方法：
树脂上的蛋白质未洗净，可采用增强溶液离子强度，更换活性高的反荷离子或使用去垢剂等办法解决；
PH值不合适，若缓冲体系的PH值与目的蛋白的P鲜责航德久距巴病送I相差太远，目的蛋白与树脂的结合会过于牢固；
蛋白质发生沉淀，可能是因为缓冲体系PH值过于接近蛋白质PI值，行酒几厂什善少溶液离子强度过低或溶液过渡稀释 ；
蛋白质在初步过滤的时候有损失；
蛋白质或者辅助因子在层析时有损失；
蛋白质水解酶破坏了目的蛋白；
树脂中有微生物。
5. 蛋白质分辨效果差
可能原因及解决办法：
层析时流速太快；
层析柱过短；
上柱蛋白过多；
梯度洗迫改混沙运整额脱时洗脱液浓度变化太快；
蛋白质可在脱离层析谓督控身么超笔促柱后再次混合，尽量减少树脂支持物与部分省轴历较既往收集期间的管道体积；
不均匀固扬械治他挥双机混到晶的装柱以至产生碎屑，，上样合洗脱时的错误操作；
树脂未进行适当平衡吧念特红病露李川的且建；
树脂中有微生物。
