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胰蛋白酶是从动物胰脏分离的一种水解酶,其主要功能为使细胞间的蛋白质水解、细胞分散。胰蛋白酶分离细胞的能力定名与细胞种类及细胞的特性有关,不同种类的细胞以及不施批供线论压出按三费散同数量的细胞采用胰蛋白酶消化的时间亦不相同。浓核三浓试例兵度大、温度高、新配制的乙反解胰蛋白酶可使细胞分离依架速度增快。胰蛋白酶溶液在pH8.0,温度为37℃时,作用能力最强。
注济意:钙离子、镁离子和血清蛋白的存在会降低胰蛋白酶活力。消化细胞时,加入一些血清或含血清的培养液,或胰蛋白酶抑制巴作立剂能终止胰蛋白酶对某杨鲁愿都细胞的消化作用。
保存条件:配制好的胰蛋白酶溶液必须保存在-20℃冰箱中,以免分解失效。
请在溶解的一周内使用贮存在4℃冰箱中的液体胰蛋白酶溶液
EDTA是一种化学螯合剂,主要作用为能螯合Ca2+、Mg2+,使细胞分离,对细胞毒性小。常用的浓度为0.02%。
胰蛋白酶和EDTA乎概穿反联合使用可提高消化效率,但需注意EDTA不能被血清中和,使用EDTA处理细胞后,一定要用Hanks液冲洗干净,因为残留的E策上光设举激聚记义英DTA会影响细胞生长。