用lipo2000转染Hepg2细胞
最近本人在做HepG2细胞的转染，转染的是GFP质粒，按照LIPO2000的说明书使用后，发现细胞的死亡很严重，24h时差不多死了一半。而且我在转染前细胞密度差不多达到90％，也在转染后6小时... 最近本人在做HepG2细胞的转染，转染的是GFP质粒，按照LIPO2000的说明书使用后，发现细胞的死亡很严重，24h时差不多死了一半。而且我在转染前细胞密度差不多达到90％，也在转染后6小时的时候换了培养基。在显微镜下看荧光的转染效率大概有70％－80%,虽然效率还可以，但是由于细胞死亡对我后续的实验有影响，所以在此请教各位高手，如何才能使细胞不死 展开
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回答者：网友
细胞的死亡很严重是因为LIPO的毒性大，虽然楼主在转染后6小时的时候换了培养基，可能还是有点晚，提前到5小时左右换液试试呢，另外楼主有没有设置梯度实验？我们实验室在做转染时每孔1ug质粒，RFECT设置2ul,3ul,4ul三个梯度，每个梯度做2个复孔，DNA和试剂的比例是1:2,用24孔板做的，转染前一天铺板转染前细胞密度在45%左右
