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回答者:网友
构建表达载体首先取决于你的实验目的,例如你的实验是否要求你的蛋白表达出来必须可溶性蛋白,载体上面的标签决定了你的纯化方法,当然也决定了实验成本,等等一系列需求。
拿带标签的载体为例,因为带标签后可以增加蛋白质的可溶性,也行即游背斗末含为纯化带来了方便,一般都会采来自用。标签一般都是在目的蛋白的N端,这样就需要考虑读码框的问360问答题,一定要与前面的读码框保持一致。
利用酶切连接的方法连入目的载盾夫应育攻论外化图煤体这个应该都知道,或者用gateway系统,非常方便,我就经常用gateway载体,构建起来速度呼呼的。
基本就是这些了吧,主要就考虑选择少介术办放队济什么标签和读码框别错了。
有什么问题可以直接发信给我