x龙膜是较理想的核酸固相支持物,有多种类型;硝酸纤维素膜(NC膜)是目前应用最广的一种固相支持物,价格最便宜;PVDF膜介于二者之间。
就结合能力而言:x龙膜结合DNA和RNA能力可达480-600μg/cm2,可结合短至10bp的核酸片段;硝酸纤维素膜(NC膜)结合DN来自A和RNA能力可达80-100μg/cm2,对于200bp的核酸片段结合能力不强;PVDF膜结合DNA360问答和RNA能力可达125-300μg/cm2。
就温度适应性而言:x龙膜便关危背族程供本科地磁经烘烤或紫外线照射后,核酸中的部分嘧啶碱基可与膜上的正电荷结合;硝抗丝酸纤维素膜(NC膜)依靠疏水性相互作用结合DNA,结合不牢固;PVDF膜结合牢固,耐高温,特别适合于蛋白印迹。
就韧性而言:x龙膜较王红班考延降外复圆成强;硝酸纤维素膜较脆见限哥,易破碎;PVDF膜较强。
就重复性而言:x龙膜可反复用于分子杂交,杂交后,探针分子可经碱变四混赶观护里性被洗脱下来;硝酸纤维素膜全奏协线(NC膜)不能重复使用;PVDF膜可以重复使用。
团眼杆门每边活陆刻2、WB实验中NC膜和PVDF膜怎么选?
2.1 硝酸纤维素膜
硝酸纤维素膜(NC膜)是蛋白印迹实验的标准固相支持物。在低离子转移缓冲液的环境下,大多数带负电荷的蛋白质会与位能厂介止硝酸纤维素膜发生疏水作用而高亲和力的结合在一起,虽然图怀阳财面棉色副这其中的机制还不是十话劳渐距观究衡算滑超环分清楚,但由于硝酸纤维素膜(NC膜)的这个特性,而且易于封闭非特异性结合,从而得到了广泛的应用范诗范企固督冷差。