优点：测定速度较快，干扰物质少，不同蛋白质产生的颜色深浅相近。
缺点：
①灵敏度差；
② 三羟甲基氨基甲烷、一些氨基酸和EDTA等会干扰该反应。
双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法，硫铵不干扰显色， Cu2+与蛋白质的肽键，以及酪氨酸残基络合，形成紫蓝色络合物，此物在540nm波长处有最大吸收。
扩展资料：
在使用双缩脲试剂时候，必须注意，必须是先加0.1 g/mL****溶液，再加0.01 g/mL硫酸铜的水溶液。若先加入硫酸铜溶液，再加入****溶液，则无法充分制造碱性环境，此时硫酸铜会与****发生复分解反应，生成蓝色氢氧化铜沉淀，导致现象不清，无法较好地达到实验目的。
参考资料来源：
