逆转录步骤

反应条件：如使用Oligo(dT)18或基因特异性引物，我们实验用的BIODAI逆转录建议反应条件为：50℃逆转录反应45分钟，再85℃ 5分钟灭活逆转录酶。如要获取的cDNA长度大于5kb，逆氧额转录时间可延长到60分钟。使用Random hexamer，反应条件建议为：25℃ 10分钟，50℃ 45分钟，85℃ 5分钟。如模板RNA有二级结构或GC含量较高，逆转录温度可设置为55℃。