(五)疏水层析和反向层析泛素介导的蛋白降解泛素介导的蛋白质降解过程如何进行?需要哪些物质的参与,它们各自的作用是什么?第一步:在一个需要ATP的反应中,泛素的羧基末端通过硫酯键与泛素激活酶E1偶联。第二步:活化的泛素立即与泛素结合酶E2的巯基相连接第三步:在泛素蛋白连接酶E3的催化下,将活化的泛素从E2转移到赖氨酸的e-氨基上,这样就形成了一个异肽键。这样连接的蛋白质在ATP依赖的反应中被降解。泛素激活酶;泛素结合酶;泛素蛋白连接酶(对靶蛋白N端氨基酸 的识别);脱泛素酶E3--种类最多,在底物的特异性选择降解过程中作最为关键成员,接受从E2转移而来的泛素分子形成E3-Ub复合物,使得E2-Ub复合物上的泛素能高效地转移到底物蛋白上。脱泛素酶:泛素C-末端水解酶——多聚泛素基因表达产物的C-末端额外短肽的去除,以及泛素延伸蛋白中泛素单体与核糖体蛋白的分离。泛素特异性加工酶——从泛素上除去蛋白;(1)水解已经被蛋白酶体识别并即将被降解的泛素缀合蛋白上的多聚泛素链,释放可重复利用的泛素单体;(2)被错误泛素化的泛素缀合蛋白上的泛素或泛素链的去除;(3)修饰底物蛋白上的多聚泛素链,使之更易于被26S蛋白酶体识别。蛋白质的变性、复性及蛋白质折叠蛋白质的变性:由于外界因素的作用,使天然蛋白质分子的构象发生了异常变化,从而导致生物活性的丧失以及物理、化学性质的异常变化变性蛋白的特征:A. 生物活性丧失b)抗原性改变c)理化性质改变:溶解度下降(沉淀)、结晶能力丧失、特性粘度增加、扩散速度下降等。d)生化性质改变:易被蛋白质水解 B. 次级键、二硫键的断裂 C. 蛋白质的复性:除去变性因素后,在适当的条件下,该变性蛋白尚能恢复其天然构象和生物学活性 D. 蛋白质折叠的学说
