安捷伦高效液相色谱c18柱的洗柱方法
我用的流动相是偏磷酸,我想知道我每次做完实验柱子要用哪种溶液清洗,具体要怎样操作呢!
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第一、安捷伦的色谱柱有很多种,所以要分清类型去冲洗。
第二、作为普民西意宽步深球白销通C18柱,尤其是硅侵赵段可民迅厂液构宜说胶基质的普通C18柱,对酸碱盐以及水,都是造成柱子的损坏的流动相构成。水不能过武未多(除了带AQ的纯水柱,一般各家品牌都有这款防水柱)我个人认为只要超过80%的水的流动相,都会造成C18的寿命缩短。所以做高水呀案合没杀区相的流动相分析时请注意选合适的管才挥柱子。酸对柱子的损伤是不可逆的,一定要控制PH,我个人认为PH在2以下的都要做好费柱子的准备。碱性条件是对于硅胶基质的C18的掌向属严够弱项,一般的硅胶基质的C18碱性条件都不太耐用,但现在也有碱性PH11的柱子,但比较贵。盐对色谱柱的影响主要是盐析造成的,而且是致命。
第三冲洗方法的问题。冲洗方法根据使用的流动相和样品的不同冲洗方法要加以区分。一般不加酸碱盐,水相也不高的情况(如车什行措甲醇水60:40),无需太过冲洗,冲洗的目的就是为了把样品的杂质冲出即可。保存流动相保存即可。酸和碱的条件下,原则上是将酸碱冲出色谱柱,保存在甲醇水即可(如60:40比例术十距绍即松可根据要使用的流动相,只要水相不高即可)。盐的条件比较麻烦,处理不好,不仅仅色谱柱出问题而且仪器也比较麻烦。常用的组包破坚声井器标陈武就是高水相流动相甲醇-承转双代设手水(10:90)将盐冲出(注意压力),然后用纯甲醇冲洗(这一步是恢复高水相对色谱柱的损伤),最后保存在一般的甲醇水体系即可。
第四点,冲洗的时候注意是压力,最好是从小流速开始慢慢提升流速到压力许可的范围。冲洗的时间,准确的是流量一般色谱柱的冲洗都要达到10-20倍的柱体积。