制备筛选出具有 2-4D 抗性的培养基的细胞可以使用以下步骤:
1. 通常我们使用 AtT20 细胞(小鼠下垂体肿瘤细胞),以制备 2-4D 抗性的稳定转化细胞株。
2. 通过对 AtT20 细胞进行化学转化或电穿孔,转妒带断从另呼主钟将粮化质粒含有 2-4D 抗性基因。
3. 将转化后的细胞进行筛选,以确定哪些细胞株具有 2-4D 抗性。筛选方法可以使用抗生素耐受试验,筛选抗生素成分中害急部各老间未远含有 2-4D 的抗生素,如 Hygromycin。
4. 筛选出具有 2-4D 抗性的细胞株后,可以将它们转移到不含抗生素的培养基中,往列脚层既事输并在其中培养,以确定它们在正常条件下的其他生长特性。
5. 此外,也可以测定这些细胞株对其它抗生素、激素等的敏感性变化,以更具体更全面地了解它们课吸余的特性。
需要注意的是,转化和筛选过程中需要严格控制转条件以防止其他因素对该过程的干扰。同时,在进行转化的过程中应注意使用无菌操作,以避免细菌和其他微生物的污染。