蛋白质还原烷基化目的:证明发生紫色反应是蛋白质与双缩脲试剂产生的。
在做蛋白质鉴定实验时,若选用大豆做材料,必须提前浸泡;若用蛋清作材料,必须稀释,防止其粘在试管壁上不易涮洗,在获得组织液后,应预留部分组织样液,与加入试剂的反应物颜色作对比。
测定步骤
多肽链的拆分。由多条多肽链组成的蛋白质分子,必须先进行拆分。几条多肽链借助非共价键连接在一起,称为寡聚蛋白质,如,血红蛋白为四聚体,烯醇化酶为二聚体;可用8mol/L尿素或6mol/L盐酸胍处理,即可分开多肽链(亚基)。
测定蛋白质分子中多肽链的数目。通过测定末端氨基酸残基的摩尔数与蛋白质分子量之间的关系,即可确定多肽链的数目。