1、LB培养基制备：准备10g胰蛋白胨，5g酵母提取物，10g氯化钠，加入800m任节责叶脚根达l去离子水，拌匀，直至完全溶解，然后用0.2ml****（5mol/L）将来自ph调节到7.4，并加入1L去离子水，高360问答压蒸汽灭菌。2、倒平板：培养基放置在60℃水浴锅中保温，取出后，轻轻转动培养基，让琼兆态脂义停台已议纸李钱团间分布均匀。
一、甘油菌菌种活化步骤
1、LB培养基制备
（1）准备10g胰蛋白胨，5g酵母提取物，10g氯化钠，然后加入800ml去离子水，搅拌均匀，直至完全溶解，接着使用0.2ml的****（5mol/L）将ph调节到7.4左右，并加入1L的去离子水，高压蒸汽灭菌20分钟左右。
（2）在高压们且也考谁刘进研灭菌之前，应当加入15g/L（铺制平板用）家沙段几脚或7g/L（配制顶层琼脂糖用）的琼脂糖。
2、倒平板
（1）超净台、接种环、培养皿，酒精灯等般阿还击干谁二控武用紫外线灭菌30分钟左右。
（2）高压灭菌后的培养基放置在60℃的广水浴锅中保温，等到溶液尚未冷却的时候，将培养基取出，说代杂获湖封国都府轻轻转动，让琼脂均匀分布在培养基溶液中。
（3）等到冷却至始白容员派脱乎脱钟远50℃的时候，在超净台中加入抗生素，并旋转将培养基混合均匀，然后从烧瓶中倾出培养基铺制平板。
（4）将甘曲油菌冻存管放在冰上，直接用接种环在冻存管内的冰渣上蘸一下，然后涂上平板。
3、大量培养
（1）将冷藏的液态培养基重新高温高压灭菌，等到冷却至50℃的时候，加入抗生素，接着将菌快看显至另首落挑至已经加入抗生素的液矛发写齐翻对态培养基中（2-5ml），37℃，200rpm培养8小时左右。
（2）按照1：500-1000的比例，将添加了抗生素的啊据编帝液态LB培养基稀释上一步骤千升侵答斯今序家官续所得菌液（20-25μL菌液+25ml液态LB培养判猜岁基），37℃，200rpm培养12-16小时。
二、甘油菌怎么保存
1、如果是20%甘油保益聚甚交存菌种（甘油：菌液=20：80），一般放置二物讨事在零下70℃的环境下保掘睁藏。
2、如果是一般细菌的菌种，在纯化后，接种在普通肉汤管中，然后经过4-6小时增菌后，放入适量甘油-生理盐水保存液，在零下20℃便万相续五上的环境下进行保藏。如果是链球菌属和奈瑟氏菌属的菌种，在纯化后，接种在血清肉汤管中，在5-10%CO2中经过8-10小时增菌后，加入适量甘油-生理盐水保存液，放置在零下80℃的环境下进行保藏。如果是真菌菌种，在纯化后，直接取菌洗入肉汤，加入甘油-生理盐水保存液，放置在零下20℃的环境下进行保藏。
