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考马斯亮蓝染色法显示细胞骨架
一、实验目的
a)掌握细胞骨架的特点及在细胞中的基本位置。
b)掌握考马斯亮蓝染色法观察细胞骨架。
c)了解各种试剂在细胞骨架染色观察中的作用。
二、实验原理
细胞骨架（cytoskeleton）是细胞内以蛋白纤维为主要成分的网络结构。广义的细胞骨架包括细胞核骨架、细胞质骨架、细胞膜骨架和细胞外基质，狭义的细胞骨架是指细胞质骨架，包括微管（microtubule,MT）、微丝（microfilament,MF）和中间纤维（intermediated filament,IF）。
微管是细胞内由微管蛋白形成的直径约20~26nm的长度不一的小管。分布在核周围，呈放射状向胞质四周扩散，主要确定膜性细胞器的位置和作为膜泡运输的导管。微管蛋白有α和β 两种。 α β异二聚体沿纵向聚合成丝，原丝成环状排列形成微管的壁。微管不稳定，对低温（冷冻）、高压等物理因素及秋水仙素（微管断裂剂）等化学因素敏感。紫杉醇可以和微管蛋白多聚体结合，抑制微管解聚。
微丝在真核细胞内主要由肌动蛋白（actin）组成的直径为5～7nm的骨架纤丝。主要分布在细胞质膜的内侧，作用是确定细胞表面特征、并与细胞运动、收缩、内吞等功能有关。脊椎动物肌动蛋白分为α、β和γ三种类型，不同种类细胞中肌动蛋白组成不同。肌动蛋白单体为球形，依次连接成链，两串肌动蛋白链互相缠绕扭曲成一股微丝。显示细胞骨架的常用方法有两种：考马斯亮蓝染色法和免疫荧光染色法。考马斯亮蓝染色法具有简单易行
